Pomůcky a chemikálie:
Spektrofotometr Helios 
, polystyrenové kyvety o tloušťce 1 cm, váhy s přesností na 1 mg, 2 ks kádinka 100-150 ml, 3 ks kádinka 50 ml, 3 ks pipeta 5 ml dělená, 1 ks pipeta 10 ml nedělená, 8 ks odměrná baňka 50 ml, 1 ks odměrná baňka 250 ml, nálevka, skleněná tyčinka, pipetovací balonek.
0,25 %ní roztok 1,10-fenanthrolinu v 0,1 M HCl, 10%ní roztok hydroxylamin hydrochloridu, acetátový pufr pH=4, vzorek doplňkové výživy s výrobcem udaným obsahem železa, standardní roztok železa o koncentraci 50 µg Fe/1 ml.
Pracovní postup:
Kalibrace:
Do odměrných baněk o objemu 50 ml si odměříme pipetou 0; 0,5; 1, 1,5; 2 a 2,5 ml standardního roztoku Fe a poté do každé baňky přidáme přibližně 10 ml acetátového pufru. Poté do baněk přidáme po 2 ml roztoku hydroxylaminu a 5 ml roztoku 1,10-fenathrolinu. Baňky doplníme po značku acetátovým pufrem a baňky uzavřeme. Po důkladném promíchání obsahu baněk je necháme 5 min stát. Poté pomocí roztoku s nulovým obsahem železa - tzv. "slepý" či referentní roztok - nastavíme nulovou hodnotu absorbance spektrofotometru a pak měříme absorbanci připravených kalibračních roztoků, vše při vlnové délce 512 nm. Z hodnot naměřených absorbancí a spočtených hodnot koncentrace kalibračních roztoků setrojíme kalibrační přímku a podle Lambert-Beerova zákona spočteme absorpční koeficient v jednotkách mg-1cm2. Ten posléze použijeme pro výpočet množství železa ve stanovovaném vzorku.
Vlastní stanovení:
Na vahách odvážíme v kádince 100-150 ml takové množství výživového doplňku, aby po jeho převedení do 250 ml odměrné baňky obsahoval přibližně 10-15 µg železa na 1 ml vzniklého roztoku. Po odvážení vhodného množství rozmícháme vzorek v kádince s přibližně 50 ml 1 mM roztoku HCl a kvantitativně převedeme do odměrné baňky o objemu 250 ml. Roztok v baňce doplníme po rysku 1 mM roztokem HCl a po uzavření důkladně obsah baňky promícháme.
Z odměrné baňky se zásobním roztokem vzorku odebereme 10 ml vzorku do odměrné baňky o objemu 50 ml. Do této baňky přidáme 2 ml roztoku hydroxylaminu a 5 ml roztoku 1,10-fenathrolinu. Doplníme po značku acetátovým pufrem. Paralelně si do druhé odměrné baňky 50 ml připravíme "slepý" vzorek, do něhož se nepřidává žádný vzorek ani standardní roztok Fe. Po promíchání obou baněk a 5 min stání odlijeme měřený vzorek a slepý vzorek do kyvet a po nastavení nuly přístroje na slepý vzorek změříme při vlnové délce 512 nm absorbanci měřeného roztoku vzorku. Ze zjištěné hodnoty molárního absorpčního koeficientu z vlastní kalibrace pak podle Lambert-Beerova zákona spočteme koncentraci Fe v měřeném vzorku a výsledek přepočteme na skutečný obsah Fe ve výživovém doplňku v jednotkách udávaným výrobcem doplňku. V závěru porovnáme údaj výrobce s experimentálně stanovenou hodnotou obsahu Fe.
Na závěr práce zásobní roztok i slepý vzorek včetně dalších vodných roztoků zbylých po stanovení železa přidáme do 2 l kádinky obsahující 1 l pitné vody. Vzniklou odpadní vodu zlikvidujeme spláchnutím větším množstvím vody ve výlevce.